博腾携手Repare Therapeutics在OPRD发表论文，彰显合成工艺开发和优化实力

近期，Repare Therapeutics与博腾股份在美国化学学会（American Chemical Society, ACS）权威刊物《Organic Process Research & Development》（OPRD）发表了论文《Scalable Synthesis of Lunresertib, a Selective PKMYT1 Inhibitor》。作为工艺化学领域的顶尖学术平台，OPRD的收录再次印证了博腾在药物合成技术领域的前沿实力——截至目前，博腾已有多项创新成果登上业界重磅期刊。

在本次研究成果中，双方科研人员共同开发了一种高效、稳健且具备规模化潜力的 Lunresertib（RP-6306）合成路线，可支持该原料药的快速量产。该合成路线包含两个钯催化的偶联反应、新颖的手性异构体拆分、一锅法水合/去甲基化序列以及提高内在纯度的重结晶过程，系统性展现了博腾在工艺优化、技术转移方面的卓越能力。

PKMYT1是CDK1磷酸化的调节因子，由于其与CCNE1扩增建立的合成致死关系，成为治疗某些DNA损伤应答类型的癌症的重要治疗靶点。Lunresertib是一种选择性和口服的生物可利用PKMYT1抑制剂，目前正在进行1期临床试验，用于治疗基因选择的恶性肿瘤。Lunresertib原料药RP-6306含有一个阻碍旋转的手性轴，该轴由氮杂吲哚和二甲基苯酚部分之间围绕C-N键的受限旋转引起。只有S-异构体具有PKMYT1活性，而相应的R-异构体是无活性的。项目初期，博腾工艺研发团队联合Supercritical Fluid Chromatography（SFC）技术团队按以下路线，采用SFC拆分的方式为客户提供了克级的RP-6306用于临床前研究。虽然该路线为客户早期的研究快速提供了符合质量要求的API，但该工艺的拆分效率低，周期长，成本高。因此急迫需要在放大制备RP-6306之前重新开发新的工艺。

已知化合物7在SFC色谱常用溶剂中溶解度低，这导致SFC拆分效率很低。因此在工艺开发前期，博腾工艺研发结合新技术平台对化合物7进行Boc衍生化，以提高溶解度，从而更有效地分离S-对映异构体，并对其进行脱保护，得到RP-6306。但该方法增加了合成步骤，并且拆分效率提升有限，未能从根本上解决周期长、成本高的问题。

由于中间体2含有碱性氨基，因此我们将注意力集中在了经典的手性盐拆分的可行性上。博腾J-STAR的研发团队据此筛选了约150种盐/溶剂组合后，最终确定了最有前景的拆分试剂手性酸(R)-CSA和拆分溶剂苯甲醚。随后博腾工艺研发团队对结晶温度，溶剂量，结晶老化时间，结晶次数进行了考察，确认了成盐手性拆分的工艺参数范围。

在确认了可放大的手性纯度提升方法后，博腾工艺研发团队对其他步骤进行了探索，以进一步降低原料成本。

如最初的合成路线所示，中间体2是通过二溴化物3与苯胺4的Buchwald-Hartwig偶联，然后与丙二腈环化而获得的。这两步反应可顺利进行，分离收率>70%。以下表格中总结了第一步的优化结果。之前已经尝试过直接取代法合成化合物5，但其效果不如钯催化的反应。当Pd2(dba)3被Pd(OAc)2替代时，催化剂负载量可以降低到0.01当量，碱的用量可以降低到1.5当量，不影响反应转化率。

对于第二步反应，博腾催化剂筛选平台最初探索了使用铜代替钯进行氮杂吲哚合成的替代催化反应条件筛选，结果却差强人意。因此，博腾工艺研发团队专注于钯催化反应条件的优化。有趣的是，直接降低催化剂负载量会导致转化不完全；但当使用较低量的丙二腈时，反应可以在更低的催化剂当量下完成。由于Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2比PdCl2更稳定，因此为该步骤最终选择了以下表格中entry 9的条件。

对于化合物8制备RP-6306，博腾工艺研发团队最初通过两步反应的方式进行，因为一锅法制备所得的最终API只有约96%的HPLC纯度。在分步法中，化合物8在甲磺酸和水中于40°C下加热1小时，几乎定量转化为化合物1，收率为100%。化合物1在甲磺酸中用DL-蛋氨酸脱甲基，以92%收率和98.8%HPLC纯度得到RP-6306。但是，这两种反应都需要大量的甲磺酸，淬灭过程会产生大量废液。

为了减少废液的产出，博腾工艺研发团队重新探索了在不分离化合物1的情况下的一锅反应。首先是确认一锅法所得产品纯度低的原因是二聚体10和脱羧杂质12导致的。脱羧可能发生在脱甲基过程中；而二聚体10的溶解性较差，它不能通过重结晶从粗RP-6306中有效去除。在经过一系列优化之后，这两个杂质在反应过程中的水平得到了降低和有效控制。

RP-6306的最终工艺如下图所示。首先是Buchwald-Hartwig胺化反应，然后是分子内环化反应，得到氮杂吲哚2。在大于100kg化合物2的规模下，使用（R）-CSA进行手性拆分，然后在苯甲醚中进行一轮重结晶，以42%收率，97.4%手性纯度得到化合物8。通过优化后的一锅法工艺制得粗RP-6306，在甲醇中再脱色结晶，将最终API的质量提升至>99.5%的手性纯度和>99%的HPLC纯度，API产出量>30 kg。

博腾作为全球领先的CDMO公司，此次与Repare Therapeutics在OPRD联合发表研究成果，得益于其多年深耕小分子药物服务领域的深厚积淀——研发团队对工艺的持续优化、金属催化与SFC等新技术的深度赋能，加上跨国团队间的高效协同，共同推动该工艺在博腾生产基地成功实现规模化落地。这不仅彰显了博腾从研发到生产的全链条技术优势，更印证了其在全球医药合作中的核心价值：未来我们将继续通过创新、可靠的CMC解决方案，助力客户突破新药研发瓶颈，让好药更早惠及大众。